蛋白质的提取和分离一般分为四步:
(1)样品处理:包括洗涤红细胞;血红蛋白稀释;离心等操作收集到的血红蛋白溶液。
(2)粗分离:透析除去分子较小的杂质。
(3)纯化:通过凝胶色谱法将分子量较大的杂质蛋白质除去。
(4)纯度鉴定:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。
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(一)样品处理
1、红细胞的洗涤:
目的是去除杂蛋白。要加入柠檬酸钠防止血液凝固;离心将血液分层,用胶头吸管吸出黄色血浆;用生理盐水洗涤。
2、血红蛋白的释放:
在蒸馏水和甲苯作用下,红细胞破裂释放
3、分离血红蛋白溶液:
离心分层;滤纸过滤去除脂溶性沉淀层;分液漏斗分出红色透明液体。
4、透析:
装入透析袋并置于磷酸缓冲液中(PH为7.0)透析。
以上是高三网小编整理的生物实验之血红蛋白的提取和分离,供大家参考和学习,希望对大家的学习有所帮助。
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