双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/mL。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。
简单的说双缩脲是一种化学物质,而检测蛋白是用的那两个试剂之所以叫双缩脲是因为检测原理和双缩脲的形成相似。
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成.
双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;
双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。得到的产物。